凉开水不是等渗液体，低渗作用可直接对疫苗毒株的微生物产生不良的影响，尤其是一些细胞苗(如最常用的猪瘟细胞苗)。低渗作用可加速细胞的崩溃和破坏，使其中的病毒颗粒暴露而降低了存活时间。凉开水的PH及其所含的矿物质、杂质等都会加速疫苗的失效。凉开水复杂的理化性质决定了它不适合作为疫苗稀释液，由于弱毒苗的核心物质是它所含的弱毒细菌或弱毒病毒，它们都是活的微生物。在疫苗制作时，最大限度地为它们提供了适宜的营养物质和生存条件，以尽量保存和维持他们的存活。
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