猪体的免疫反应是一个复杂的生物学过程,受诸多内外因素的影响。近年来,在人工免疫过程中,发现因应激、免疫功能下降或免疫抑制等原因都可导致畜禽免疫效果下降,如何提高猪体的免疫功能是摆在兽医研究工作者面前的一个重要课题。中药可调整和明显增强机体免疫功能,使参与细胞免疫的细胞数量增加、活性增强,使参与体液免疫的抗体增加。本试验旨在探讨中药对猪接种猪瘟疫苗后的免疫调节作用,为养猪生产提供可靠的依据。
1 材料与方法
1.1 中药免疫增强剂 由黄芪、党参、何首乌、淫羊藿、女贞子、白术、白芍、五味子、当归、鹿角胶、麦冬11味中草药组成。按比例配方粉碎过60目筛,塑料袋500 g分装备用。
1.2 猪瘟兔化弱毒苗 山东齐鲁动物药品厂生产,批号:040208。
1.3 猪瘟正向间接血凝诊断液(包括阴性、阳性血清和稀释液) 购自中国农业科学院兰州兽医研究所,批号为20040304。
1.4 其他材料 96孔110°V型血凝板、50 μl微量移液器、微型振荡器等。
1.5 实验猪 由临沂师范学院郯南养殖基地和苍山县畜牧局良种猪繁育示范场提供,选30~35日龄的健康三元杂交仔猪〔杜洛克×(约克夏×长白)〕,试验分别在临沂和苍山县两地进行,两地分别选取仔猪各100头(公母各半),随机分为5组,每组20头,Ⅰ组为不用药对照组, Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 组为中药免疫增强剂低、中、高剂量试验组,Ⅴ组为安全试验组。
1.6 试验方法 Ⅰ组不用药;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 组从疫苗接种的当日开始,用自制中药免疫增强
剂分别按0.5%,1%,1.5% 3个添加水平混饲给药,以上各组连续用药3天。于投药第1天,试验组与对照组均进行猪瘟兔化弱毒苗接种,每头仔猪2头份。Ⅴ组按6%饲料添加中药免疫增强剂,连续用药7天,停药观察10天。试验期间5个组饲养管理条件基本一致。
1.7 血样 于疫苗接种前一天和疫苗接种后的15天、45天、75天和105天,分别由试验组和对照组猪只耳静脉采血5 ml,析出血清,供测定血清抗体用。同时,分别取试验组和对照组猪只血样作成血涂片,供检测T淋巴细胞用。
1.8 抗体检测 用正向间接血凝试验(IHA) 法测定血清抗体效价水平。其操作方法和判定标准,均按《猪瘟正向间接血凝诊断试剂使用说明书》进行。试验数据取几何均数,试验组和对照组的数据比较用t检验分析。
1.9 T淋巴细胞计数 应用酸性α醋酸萘酯酶(ANAE)染色法,检查血涂片中T淋巴细胞占淋巴细胞总数的百分率。
2 试验结果
2.1 猪瘟抗体水平见表1 由表1可以看出,4个组的母源抗体水平均在1∶8~1∶64之间,比较平稳。试验结果表明,以1%和1.5%添加中药免疫增强剂的实验猪,IHA抗体效价水平都显著高于对照组(P
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