摘　要：根据副鸡嗜血杆菌的16 S rDNA基因序列设计一对特异性引物XZIC1和XZIC2，对6株副鸡嗜血杆菌进行PCR扩增。结果显示，该对引物对6株副鸡嗜血杆菌均扩增出与预期大小相一致的282 bp片段，而对鸡毒支原体、禽巴氏杆菌、鸡传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌、禽流感病毒(H9)、鸡喉气管炎病毒及葡萄球菌等9种病原体的扩增结果均为阴性。该PCR敏感性结果表明，本方法可以检测到10 pg的副鸡嗜血杆菌DNA模板。采用引物XZIC1和XZIC2，对分别用副鸡嗜血杆菌ctcc253、ctcc255、ctcc257、ctcc269株感染SPF鸡的临床病料DNA进行PCR扩增，均可扩增出单一的282 bp的片段。

关键词：PCR；副鸡嗜血杆菌；检测

鸡传染性鼻炎(Infectious coryza， IC)是由副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum，HPG)引起的一种上呼吸道疾病，最明显的症状是鼻道和鼻窦有浆液性或黏液性分泌物流出、面部水肿和结膜炎，肉垂出现明显肿胀[1]。该菌有A、B、C 3个血清型，主要引起育成鸡生长不良，产蛋鸡产蛋率下降，给养鸡业造成很大的经济损失[2]。目前诊断鸡传染性鼻炎的方法主要用传统的细菌培养和生化鉴定副鸡嗜血杆菌，由于副鸡嗜血杆菌对营养要求高，不易培养，而且该菌常常与其它细菌混合感染，无法快速鉴别诊断，因此应用特异、快速、敏感的聚合酶链反应(PCR)检测副鸡嗜血杆菌技术就显得非常重要。据报道陈小玲等[3]用鸟枪法建立的HPG基因文库，建立了HPG的PCR诊断方法，宋敏训等[3]利用aroA基因建立鸡传染性鼻炎PCR诊断方法，在国内末见应用16 S rDNA基因PCR检测诊断鸡传染性鼻炎的报道，本试验根据副鸡嗜血杆菌高度保守的16 S rDNA基因建立了PCR检测方法。

1　材料与方法

1.1　菌株

副鸡嗜血杆菌(ctcc253、ctcc255、ctcc256、ctcc257、ctcc258、ctcc269)由中国国家兽医微生物菌种保藏管理中心购买。鸡毒支原体(MG