色谱条件与系统适用性试验：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-三乙胺（70：30：0.3）（含庚烷磺酸钠10mmol/L，用磷酸调pH至4.0）为流动相；检测波长为260nm。理论板数按克霉唑峰计算不低于2500。
文献报道的方法：
刘晓琳等用RP-HPLC法测定双唑秦栓中甲硝唑、克霉唑和醋酸氯己定的含量。仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪。色谱柱以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-三乙胺（70：30：0.3）（含庚烷磺酸钠10mmol/L，用磷酸调pH至4.0）为流动相；检测波长为260nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃。
黄东萍等用RP-HPLC法测定双唑秦栓中甲硝唑、克霉唑和醋酸氯己定的含量。仪器：Waters高效液相色谱仪。色谱柱为Kromasil C18（150mm×4.6mm）；以甲醇-水相（庚烷磺酸钠3g，三乙胺2.5ml，加水至1000ml，冰醋酸调pH至2.5）（65：35）为流动相；流速：1.0ml/min；检测波长：甲硝唑315nm，克霉唑和醋酸氯己定为260nm。
范荣等用RP-HPLC法测定双唑秦栓中甲硝唑、克霉唑和醋酸氯己定的含量。仪器：LC-10AT高效液相色谱仪。色谱柱为VPP-ODS柱；流动相：水-乙腈-冰醋酸（70：30：1）；检测波长254nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温。