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胎衣不下是奶牛常见产科疾病之一。据报道，我国奶牛胎衣不下发病率为20%～45%，在炎热季节某些牛场发病率高达70%。该病直接引发子宫内膜炎，导致不孕症和产奶量下降，造成奶牛死淘率增加，给奶牛业造成严重的经济损失。尽管国内外对本病的防治研究投入了巨大的人力、财力，推出了不少防治方法，但无论中药、西药，还是手术剥离都存在见效慢、易继发感染等缺点，至今各地的发病率仍居高不下，并有逐渐上升趋势，成为目前影响奶牛业发展的最严重胎产病之一。为此，我们根据中西兽医理论和临床实践，制备了中西兽药合剂“胎衣顺畅”，用于预防奶牛胎衣不下效果较好，报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物选择与分组 由北京市通县渠头奶牛场提供预产前2个月的2～4胎龄妊娠北京黑白花奶牛18头，按年龄、胎次、体质状况和预产期接近的原则严格配对，随机分为试验组(9例)和对照组(9例)。供试牛均在干奶期由专人饲养，统一基础日粮标准，每日饲喂3次，运动场自由饮水、运动。
1.2 中西兽药合剂“胎衣顺畅” 经多次筛选，“胎衣顺畅”由当归、川芎、益母草、桃仁、炮干姜、草果、红糖、亚硒酸钠、钙粉、维生素E按适当比例组成，中药均购自北京同仁堂，粉碎为末；西药均购自通县第一医药公司。试验组奶牛产犊后立即灌服“胎衣顺畅”，每牛1剂(650 g)，对照组不做任何处理。
1.3 血样采集与处理 产后0 h(产犊后立即采血计为0 h)、4 h、8 h、12 h、16 h自颈静脉采血4 ml，肝素(30 IU/ml全血)抗凝，3 000 r/min离心10 min分离血浆，-20℃冰箱内保存待测NO、GSHPx、MDA。
1.3.1 一氧化氮(NO) 用硝酸还原酶法。试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按试剂盒规定方法测定。
1.3.2 谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx) 二硫代二硝基苯甲酸法。试剂盒购自南京建成生物工程研
所，按试剂盒规定方法测定。
1.3.3 丙二醛(MDA) 硫代巴比妥酸法。试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按试剂盒规定方法测定。
1.4 定期观察记录奶牛生产情况 主要记录试验组和对照组奶牛胎衣不下发病率、产后恶露排尽时间、子宫内膜炎发病率、产后发情时间和产后90天内产奶量。
1.5 生物学统计方法 组间比较采用均数差异显著性检验(t检验)，组内比较采用
方差分析(F检验)。
2 结果
2.1 NO测定结果 结果见表1（略）。结果表明，试验组NO呈逐渐降低趋势，0 h显著高于4 h(P＜0.05)；4h极显著高于8h、12h、16h(P＜0.01)。组间比较，试验组8h、12 h、16h极显著低于对照组(P＜0.01)。
表1 试验组与对照组奶牛NO变化比较(μmol/L)（略）
2.2 GSHPx测定结果 结果见表2（略）。结果表明，试验组GSHPx呈逐渐升高趋势，0 h极显著低于4 h，4 h极显著低于8 h、12 h、16 h(P＜0.01)。组间比较，试验组4 h、8 h、12 h极显著高于对照组(P＜0.01)。
2.3 MDA测定结果 结果见表3（略）。结果表明，试验组MDA呈逐渐降低趋势，0 h极显著高于8 h、12 h、16 h(P＜0.01)。组间比较，试验组4 h、8 h、12 h、16 h极显著低于对照组(P＜0.01)。
2.4 主要繁殖指标
结果见表4（略）。结果表明，试验组发病1例，发病率为11.1%，对照组胎衣不下4例，发病率为44.4%，极显著低于对照组(P＜0.01)；试验组恶露排尽时间平均为15.3天，对照组平均为24.4天，显著短于对照组(P＜0.05)；试验组感染子宫膜炎2例，发病率为22.2%，对照组感染子宫内膜炎6例，发病率为66.7%，极显著低于对照组(P＜0.01)；试验组产后首次发情时间为49.3天，对照组为70.6天，显著短于对照组(P＜0.05)。
表3 试验组与对照组奶牛MDA变化比较（略）
2.5 产奶量变化
结果见表5。结果表明，产后产奶量呈先升高再逐渐降低趋势，产后45～60天达到产量高峰期，15天极显著低于30天，30天极显著低于45天、60天、90天(P＜0.01)；45天、60天显著高于90天(P＜0.05)；组间比较，试验组30天极显著高于对照组(P＜0.01)，45天、60天显著高于对照组(P＜0.05)。
表5 产后试验组与对照组产奶量测定结果（略）
3 讨论
3.1 结果表明，试验组NO呈逐渐降低趋势，0h显著高于4 h(P＜0.05)；4 h极显著高于8h、12h、16h(P＜0.01)。组间比较，试验组8h、12h、16h极显著低于对照组(P＜0.01)，说明“胎衣顺畅”能促进子宫的康复，降低胎衣不下和子宫内膜感染率，可能与降低NO的含量有关。从现代医学的观点看，由于分娩时的产道损伤和开放，恶露排出以及体质虚弱等因素，机体往往发生不同程度的炎症反应。许多试验结果证实，炎症期致炎因子刺激诱生型一氧化氮合酶，生成大量NO，促进炎症反应。当NO浓度过高时，它可直接与体内巯基的生物分子发挥正常的生理功能；NO可抑制线粒体顺乌头酸酶、线粒体电子传递链复合物Ⅰ和Ⅱ、核糖核酸还原酶，进而抑制细胞内ATP和DNA的合成，导致细胞死亡；NO本身还可对基因的表达产生作用；NO与O2-在组织细胞内极快地反应生成过氧化亚硝酸根(ONOO-)ONOO-具有强氧化性，引起生物膜脂质过氧化，介导蛋白巯基和非蛋白巯基的氧化，从而引起多种重要生物大分子如蛋白质、核酸、酶等的损伤破坏，强烈抑制细胞氧化作用，从而使新陈代谢紊乱，ONOO-在酸性条件下(病理情况往往如此)，生成其共轭酸ONOO-，并很快裂解成更强的氧化剂NO2和-OH，过量的NO本身及自由基链式反应各级产物(ONOO-、NO2、-OH)对机体组织器官造成一系列损伤，损伤加重炎症反应，恶性循环的结果NO生成过多，成为许多疾病的重要促进因素。这与我们的实验基本一致，试验组胎衣不下发病率降低，子宫黏膜损害减轻，炎性变化减弱，可能与NO的含量降低有关。
3.2 机体在新陈代谢过程中，会产生各种自由基，其中95%是氧自由基，关于氧自由基与预防胎衣不下的关系未见报道，但关于氧自由基、抗氧化酶与气虚证、血瘀证关系的报道，基本上肯定了在发生气虚证、血瘀证(如患胎衣不下)时，血液中氧自由基含量增加，抗氧化酶活性降低这一事实，本试验也证实了这一点。陈文为认为，从能量代谢方面而论，细胞内ATP合成不足是产生气虚证的内在物质基础，而ATP合成率降低又与自由基代谢有密切联系。这主要是由于致病因素引起机体清除自由基的能力下降，积累过剩的自由基首先与线粒体内外膜脂肪酸发生脂质过氧化，破坏膜脂层结构与功能交替损伤的恶性循环，以致维持正常生命活动的能源不足，子宫收缩无力，导致胎衣排出困难。另有大量实验证实，体内脂质过氧化反应增强，清除氧自由基能力减弱，造成体内自由基反应紊乱，可导致微循环障碍、血瘀证，而导致胎衣不下。本试验中，试验组奶牛血浆MDA极显著低于对照组，血浆GSHPx活性升高时，MDA含量就逐渐降低，GSHPx降低时，MDA则逐渐升高，说明血浆中GSHpx、MDA的变化参与了产后胎衣不下的发生、发展与转归过程。
许多研究证实，人和动物的GSHPx活性依赖日粮中的硒含量，动物组织GSHPx活性可能是血硒水平的敏感指标。GSHPx的分子生物学实验揭示，日粮硒是GSHPx酶分子中硒的惟一来源。GSHPx活性的高低间接反映机体清除氧自由基的能力，MDA含量的高低间接反映机体受自由基攻击的严重程度。本试验中，产后试验组奶牛血浆GSHPx呈逐渐升高趋势，产后4 h、8 h、12 h极显著高于对照组(P＜0.01)；MDA呈逐渐降低趋势，试验组4h、8h、12h、16h极显著低于对照组(P＜0.01)。这说明含有硒和维生素E的“胎衣顺畅”具有增强奶牛机体清除自由基的能力。
3.3 本实验证实，试验组奶牛胎衣不下发病率极显著降低，恶露排尽时间显著缩短，子宫内膜炎发病率极显著降低，产后首次发情时间显著缩短，产奶量显著增加，表明“胎衣顺畅”具有改善奶牛繁殖性能的作用，但其机理有待进一步研究。
4 结论
4.1 本研究证明，“胎衣顺畅”具有降低奶牛血浆中NO含量，提高GSHPx活性，降低血浆中MDA含量的作用。
4.2 本研究证明，“胎衣顺畅”具有显著降低奶牛胎衣不下和子宫内膜炎发病率，缩短恶露排尽和首次发情时间，提高产奶量的作用。
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