由于目前抗球虫化药耐药性的不断出现和药物有害残留的日益困扰，研究和开发用绿色无公害的中草药防治鸡球虫病便显得十分重要。笔者经过多次试验研究发现，由常山、柴胡、地榆和绞股蓝组成的中药复方——“禽球灵”具有较好的抗球虫效果，为了搞清四种分在组方中所起的作用，以及各组分间的最佳用药配比，首次应用正交试验的方法进行了研究分析。
1 材料与方法
1. 材料 试验用鸡系由保定市种鸡场购进的海赛克斯1日龄雏鸡。购进后在消毒的铁丝笼内隔离饲养至10日龄，再经2～3天观察后，作为试验用鸡；试验用中药均购于安国市药材批发市场；试验用球虫卵囊系由河北省畜牧兽医研究所张勤研究员提供，试验前经无球虫雏鸡复壮一次。
1.2 方法 本试验采用L9(3４)正交表进行设计，将常山、柴胡、地榆和绞股蓝4个组分分别用大、中、小3个剂量(见表1)，按正交表提供的配方组成9个不同的组方进行试验。具体方法是选择12日龄、体重相近的健康小雏鸡110只，随机分为11组，每组10只。1～9组分别为按L9(34)正交设计表所设计的9个不同中药组方的用药组，10组为感染不给药对照组，11组为不感染不给药对照组，用药组提前3天给药。感染组每只鸡人工感染E.tenella孢子化卵囊1.0×10５个，然后计算各组的抗球虫指数(ACI)，最后以ACI值为疗效指标，分析方中4种组分的作用和最佳用药剂量。
表1 4种组分的3种剂量
因素 A(常山) B(柴胡) C(地榆) D(绞股蓝)
1 水平 大剂量 大剂量 大剂量 大剂量
2 水平 中剂量 中剂量 中剂量 中剂量
3 水平 小剂量 小剂量 小剂量 小剂量
1.3 抗球虫指数(ACI) 采用默克公司的标准，即抗球虫指数＝(相对增重率+存活率)-(病变值+卵囊值)。
2 结果与分析
2.1 各组分对“禽球灵”抗球虫效果(ACI)的影响情况
由直观分析结果(见表2)可以看出RA＞RB＞RD＞RC，说明组方中各组分对ACI值的作用大小依次为A(常山)＞B(柴胡)＞D(绞股蓝)＞C(地榆)。同时方差分析还证明(见表3)，常山对“禽球灵”的ACI影响极显著(P＜0.01)；柴胡对“禽球灵”ACI也具有显著的影响(P＜0.05)；而地榆和绞股蓝对组方ACI的影响则不显著(P＞0.05)。
表2 正交设计表及结果分析
表3 各因素方差分析：由于未做重复试验，故将对ACI值影响最小的C因素(地榆)视作空行在A组分(常山)中，x1＞x2＞x3(见表1)，且3个用药剂量对组方ACI平均值的影响两两间差异皆极显著(P＜0.01)(见表4)，说明在所设的3个剂量水平中，常山以选取大剂量水平效果最佳；同理，B组分(柴胡)以中剂量水平效果为最佳。
表4 A组分(常山)各水平平均数相互比较
表 5 B组分(柴胡)各水平平均数相互比较
2.2 各组分不同剂量对“禽球灵”抗球虫效果(ACI)的影响情况
由于地榆和绞股蓝对组方的ACI值影响不显著，所以在组方中选取小剂量水平即可。这样，该中药复方四组分间的最佳用量组合为：A1B2C3D3，即常山用大剂量，柴胡用中剂量，地榆和绞股蓝都用小剂量。
3 讨论
3.1 应用正交试验的方法分析中药复方各组分在整体组方中所起作用的大小以及各组分的最佳用药剂量，可以避免进行大量的拆方试验，从而大大缩短了中药组方研究开发的时间。但本方法的难点是怎样将中药复方的整体功效综合为一个量化的指标。本试验以抗球虫指数(ACI)作为整个组方的疗效指标，基本上全面概括了整个组方的作用。
3.2 常山驱杀球虫的功效已被大量的临床试验所证实。现代药理学研究也表明其主要有效成分是常山酮。本试验通过正交分析发现，常山剂量的变化对整个组方抗球虫指数具有极显著的影响(P＜0.01)。这便从统计学的角度进一步证实了常山的抗球虫作用，从而为常山抗球虫特性的研究提供了新的科学依据。
3.3 地榆能凉血、止血。本研究也表明，配有地榆的中药复方制剂可明显改善球虫病鸡的血便数(结果另报)。但统计分析地榆对组方的抗球虫指数没有显著的影响(P＞0.05)，这多可能与ACI值的计算方法有关。
3.4 通过统计学分析，绞股蓝对整体组方ACI的影响不显著(P＞0.05)，但通过另外研究发现将上述筛选出的中药复方以1%给鸡添加，结果试验鸡的增重率和饲料利用率均显著高于不添加组(P＜0.05，结果另报)，而且还具有增重和提高饲料报酬的作用。为此仍在复方中保留了绞股蓝。
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