紫雏菊（EchinaceaPurpurea）为菊科多年生草本植物紫锥菊的干燥根、茎叶和花，紫雏菊是北美洲大草原的多年野生植物，作为药用植被在整个北美洲和欧洲已经使用了几百年，传统上紫雏菊被土著美洲人应用于很多方面，1887年，紫雏菊被引入美国医疗实践中，从感冒到病毒都有它的用武之地，而紫雏菊的现代研究则开始于20世纪30年代的德国。紫雏菊的免疫调节功效来源于其所含的大量多糖及植物甾醇有关，具有抗细菌、抗病毒、抗真菌、消炎、刺激免疫应答、增强免疫系统功能、预防流感、促进伤口愈合、缩短患期的作用，主要用于治疗上呼吸道感染、伤寒、副伤寒、细菌感染、病毒感染、中轻度感染及严重混合感染等。紫雏菊提取物配以双花提取物、盐酸氨溴索和对乙酰氨基酚联合制成的中西药复方注射液，具有标本根治的作用，用于治疗家畜呼吸系统混合感染取得了显著的效果，避免了单方多用，多方联用的繁琐给药，大大节省了养殖户的烦劳工作，降低了养殖用药成本并且利国利民。

一、复方紫花索酚注射液的研究现状及进展

复方紫花索酚注射液是以紫雏菊提取物、双花提取物、盐酸氨溴索和对乙酰氨基酚共四种原料，经精制、配制、醇溶水沉、水溶醇沉、热溶冷沉等工艺制成的复方中兽药新药注射剂，是我国自行研制的中西药复方制剂，性状为淡黄色澄明液体；pH值为5.5-6.5；规格为10ml/支；其功能为清热解毒、理气化痰、止漱平喘、解热镇痛，主治家畜呼吸道感染、伤寒、副伤寒、细菌感染、病毒感染、中轻度感染及严重混合感染，目前国内尚未有该制剂和其它剂型的研究开发和上市销售。

二、复方紫花索酚注射液研究背景及立题依据

家畜呼吸系统和混合感染的致病因素主要为病原微生物，包括细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌和蠕虫等；其次为粉尘、烟雾、化学刺激剂、过敏原（变应原）和有害气体均易随空气进入呼吸道和肺部；其三为条件的变化，比如突然更换日粮、断奶、寒冷、贼风侵袭、环境潮湿、通风换气次数不良、高浓度的氨气及不同年龄的动物混群饲养、长途运输等。近年来呼吸道疾病和混合感染已成为各大养猪场最常见、危害最严重的疾病之一，已经成为影响养猪场经济效益的主要因素之一，造成家畜死亡率高、成本高、饲料转化率降低、被毛粗乱、消瘦、生长缓慢或停滞，给猪场造成较大的经济损失，危害性日益突出，受到国内外养殖业者的普遍关注。因注射液生物利用度为100%，药效迅速，为使中西药联合使用并发扬我国中药大国的瑰宝传统和发挥中兽药的优势，为贯彻2012年中央一号文件和服务于农业部两个工作重点，为减少家畜死亡率、增效增产、健康养殖、切实提高养殖户的经济效益，向兽药市场提供一种家禽用的安全、有效、复方中兽药新制剂产品已势在必行。

三、复方紫花索酚注射液中各成分功效及性质

1．紫雏菊（EchinaceaPurpurea）别名紫松果菊、紫锥菊、紫锥花，原产美洲，药用价值高，因其头状花序形似松果而得名，干燥根形似川木香，细度条形，棕黑色，有油性，淡而清香，有甜味。紫锥菊提取物（EchinaceaHerbP.E.）为菊科植物紫锥菊（EchinaceaPurpurea）全草的提取物，性状为棕黄色至棕色粉末，气微香甜，味苦，性温，归心、肺、肝经，溶于甲醇、乙醇和水中，容易吸潮，应置于避光、密闭、阴凉干燥处保存。具有良好的抗病毒、抗细菌、抗真菌及消炎的作用，具有增强免疫系统,预防流感、缩短感冒患期的功效，促进伤口愈合，缓解疼痛等多重功效，可作为免疫调节剂及免疫刺激素，广泛应用于保健品、兽药、功能性食品添加剂等领域。目前作为药物开发的主要有紫松果菊（Echinaceapurpurea），狭叶紫锥菊（Echinaceaaugustifolia）和白色紫锥菊（Echinacenpallida）共三个品种，在我国湖北，陕西有大面积种植，在北京、上海、南京有引种，随着药用技术和种植的科技发展，近年来冬季开花栽培方法及专利也越来越多，倍受到国内植物种植业的青睐。紫雏菊及其提取物有效成分为酚类化合物，如紫锥菊皂甙(Echinacoside)、毛蕊糖甙(Verbascoside)、菊苣酸(Cichoricacid)、咖啡酸(Caffericacid)、绿原酸(Chlorogenicacid)、异氯原酸等，还含有多种烷基胺、黄酮、多糖和少量挥发油，主要成分为菊苣酸和多酚，菊苣酸能抑制透明质酸酶和HIV-1整合酶,并在体内体外具有细胞吞噬促进作用和抗病毒活性，具有保肝、抗菌、抗感染、抗过敏等作用。

2．双花别名金银花、忍冬、银花等，自古被誉为清热解毒的良药，性寒、味甘、气芳香，归肺、胃经；具有清热解毒，疏散风热。主治痈肿疔毒初起，红肿热痛，外感风热，温病初起，热毒血痢，暑热烦渴，咽喉肿痛。其独特之处为清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证，均效果显著。其药用功效为抗菌及抗病毒。即对金葡菌、溶血性链球菌、肠炎痢疾、伤寒、脑膜炎双球菌、肺炎双球菌、绿脓以及流感病毒等都有明显抑制作用；增强免疫功能，能促进淋巴细胞的转化，增强白细胞的吞噬功能；抗炎、解热。另外双花尚有兴奋中枢和抗内毒素等功效。

3．盐酸氨溴索化学名为Cyclohexanol,4-[[(2-Amino-3,5-dibromophenyl)methy，性状为白色至微黄色结晶性粉末；几乎无臭。在甲醇中溶解，在水中略溶，在乙醇中微溶。熔点为235-240℃，它可促进呼吸道内部粘稠分泌物的排除及减少粘液的滞留，因而显著促进排痰，改善呼吸状况，可使咳嗽及痰量显著减少，呼吸道黏膜上的表面活性物质因而能发挥其正常的保护功能。t1/2为7-12小时，主要由肝脏代谢，90%由肾脏清除。

4．对乙酰氨基酚别名对羟基乙酰苯胺、扑热息痛、N-乙酰对氨基酚、N-(4-羟基苯基)乙酰胺、醋氨酚、对羟基苯基乙酰胺等，英文名为4-Acetamidophenol，性状为白色结晶性粉末，解热作用与阿司匹林相似，镇痛作用较弱，无抗炎抗风湿作用，是乙酰苯胺类药物中最好的品种，对血小板凝血机制无影响，口服吸收迅速，完全，在体液内分布均匀，大部分在肝脏代谢以葡萄糖醛酸结合物形式或从肾脏排泄，t1/2为1-4小时，临床使用安全，不良反应较少。

四、复方紫花索酚注射液处方筛选和工艺考核

复方紫花索酚注射液是根据主药的理化性质、给药途径和药效，选择了无水乙醇、注射用水、葡萄糖和氯化钠进行了处方筛选和工艺制备，并进行了性状、澄明度、pH值、无菌、细菌内毒素、稳定性、成本和疗效的对比和检测，详见表1。

表1处方筛选

组分(g)

处方1

处方2

处方3

处方4

处方5

处方6

紫雏菊提取物

5

5

10

10

10

20

双花提取物

5

5

8

8

10

10

盐酸氨溴索

2

2

3

3

5

5

对乙酰氨基酚

2

2

5

5

7

7

氯化钠

-

-

9

9

-

-

葡萄糖

-

-

-

-

20

50

乙醇（ml）

5

10

7

-

6

15

注射用水加至(ml)

1000

1000

1000

1000

1000

1000

针用活性炭（g）

0.5

0.5

1

1

2

2

pH值

5.5

5.8

5.9

6.0

5.7

6.5

用活性炭

0.05

0.1

0.2

0.1

0.1

0.05

性状

淡黄色

淡黄色

淡黄色

淡黄色

微黄色

黄色

微孔滤膜过滤

0.8um

0.6um

0.45um

0.45um

0.22um

0.22um

过滤速度

快速

快速

中速

中速

慢速

超慢速

澄明度

合格

不合格

合格

合格

合格

浑浊

pH值

4.5

4.2

5.6

5.8

5.7

-

无菌

合格

-

合格

合格

不合格

-

细菌内毒素

合格

-

合格

合格

不合格

-

加速6个月稳定性

不稳定

-

较稳定

稳定

-

-

成本

较低

-

高

低

-

-

疗效

不显著

-

较显著

显著

-

-

由结果可以看出，应用处方3和处方4较好，考虑到产品的性价比，因此选处方4作为该产品的最佳组方。

五、复方紫花索酚注射液制备方法

紫雏菊提取物和双花提取物用总体积1/3的注射用水搅拌下溶解，加注射用水至全量的1/2；依次加入盐酸氨溴索、对乙酰氨基酚和氯化钠，搅拌下至完全溶解；按全量加入0.1%针用活性炭，循环下搅拌脱色20-30分钟，粗滤脱炭；取样检测半成品性状、pH值和含量；用0.45ｕm微孔滤膜精滤至澄明度合格；灌封，装量控制在10.0-10.5ml，100℃流通蒸汽灭菌30分钟；2000LX灯检仪灯检，包装，即得复方紫花索酚注射液。

六、中试产品扩大生产与全项检验

按照处方2在农业部GMP认证的万级下局部百级的洁净车间内连续生产三批中试，并进行全项检验，见表2：

表2中试产品检验

批号/项目

性状

鉴别

pH值

澄明度

装量

无菌

细菌

内毒素

含量

20140301

淡黄色澄明液体

符合规定

5.8

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

20140302

淡黄色澄明液体

符合规定

6.0

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

20140303

淡黄色澄明液体

符合规定

6.0

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

符合规定

七、产品优势和有益效果

经过长期试验研制成功的复方紫花索酚注射液经性状、鉴别、pH值、澄明度、装量、无菌、细菌内毒素、含量等各项指标检验，加速和长期稳定性各项指标均达到了最优化，注射后效果明显优于单方制剂，该产品比紫雏菊注射液工艺简单、成本低、污染少、生物利用度高、药效迅速，适合工业化生产。该产品可单独使用，重症混合感染时不需和其它中兽药和抗生素配伍使用，避免了繁琐用药，降低了养殖业成本，大大节约了劳动成本，该产品属于中西药复方制剂，西药多年来经临床研究安全，该产品隶属绿色药品，其具备有使用安全、不易产生耐药性，在临床中无药残等特点，该产品的开发具有较好的经济效益和社会效益，无废气产生。该产品可替代部分抗生素，弥补了国内兽药市场在中西药复方产品方面的空白，充分体现了中西药复方注射液在兽药中的优势，是国内制剂产品加工技术的重大突破，为国内家畜严重混合感染疾病治疗方面开辟了新产品新组方，促进国内健康养殖新概念，同时也提升了兽药行业的自主创新能力。