半胱胺盐酸盐对仔猪胃黏膜细胞H -K -ATPase活性和生长抑素表达的影响

　　(南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室,江苏南京210095)

　　胃酸分泌是由胃组织中壁细胞来完成的,H -K -ATP酶(H -K -ATPase),又名质子泵,在胃酸分泌过程中起着关键作用。它通过自身磷酸化和去磷酸化,将细胞外液中的K 转运入细胞内,同时逆浓度梯度将细胞内的H 泵出细胞外,完成H /K 电中性跨膜离子转运和胃酸分泌功能。H -K -ATPase专一性的存在于壁细胞中,H -K -ATPase的活性增强,胃酸分泌能力也相应增加,反之则相反。目前人们常以胃液的pH来判断胃的泌酸功能,但由于胃液的酸度受到食糜和胃其他分泌物的影响,这个指标并不能完全反映胃自身泌酸能力的强弱。因此,H -K -ATPase不仅可以更精确客观地衡量胃酸分泌能力,同时也是所有胃酸分泌调控途径的最后作用靶点。在人医临床上已开发了许多抑制H -K -ATPase活性的药物,如奥美啦唑、兰嗦啦唑等,用来治疗胃酸分泌过多症,而对增强H -K -ATPase活性的药物研究相对较少。仔猪腹泻给养殖业带来了巨大损失,而胃酸分泌不足是导致仔猪腹泻的重要原因,如何有效地促进胃酸分泌是人们关注的热点。

　　半胱胺(cysteamine,CS)是生长抑素(somatostatin,SS)的耗竭剂,它通过破坏SS半胱氨酸残基上的二硫键,使SS生物活性和免疫活性丧失,从而解除SS对胃酸分泌的抑制作用,促进胃酸分泌。尽管已有很多关于CS的报道,但在畜牧上大多集中在CS的促生长作用上,而CS对仔猪胃酸分泌调节的研究尚未见报道。在人医临床上CS对胃酸分泌调节的研究大多以鼠为动物模型,并且以整体实验为主,而体外研究的报道较少。在整体情况下,影响胃酸分泌的神经体液因素很多并且很复杂,而体外条件下细胞不受体内复杂内环境的影响,细胞周围的环境也易于控制,因此结合体外试验能更好地研究胃酸分泌的调节。不论是体内还是体外试验,都还未见CS对H -K -ATPase表达和活性影响的报道。因此,本试验通过半胱胺盐酸盐(cysteaminehydrochloride,CSH,有效成分是CS)处理体外培养的仔猪胃黏膜细胞,探讨CSH对H -K -ATPase表达和活性的影响,并同时观察SS表达的变化,以期在细胞和分子水平深入揭示CS对仔猪胃酸分泌功能的调节及其可能的作用机制。

　　1材料与方法

　　1.1实验材料和试剂

　　28日龄哺乳期健康仔猪购自江苏农科院实验猪场,体质量8kg左右。CSH(Sigma公司,M6055,纯度